PCR空白对照出现阳性结果的原因我做检测时设置了空白对照,结果空白对照出现了阳性片断.以为引物污染,但换新的引物后仍有相同结果,只是片断变弱.请给各位高手指教,一般情况下,可能时什
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/27 11:03:56
PCR空白对照出现阳性结果的原因
我做检测时设置了空白对照,结果空白对照出现了阳性片断.以为引物污染,但换新的引物后仍有相同结果,只是片断变弱.请给各位高手指教,一般情况下,可能时什么试剂污染所致?
非常感谢!
最有可能水被污染了.建议你更换全套体系,阴性对照出结果什么结果都没用.
看看自己待扩增的片段的保守性特别注意引物结合区的保守性,如果保守性高的话那么空白对照在污染杂菌的情况下出现假阳性的可能性就非常高了。双蒸水经0.22微米滤器过滤后使用,另外所有其余试剂需要全新订购并且只能在PCR专用超净台中打开并混合。...
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看看自己待扩增的片段的保守性特别注意引物结合区的保守性,如果保守性高的话那么空白对照在污染杂菌的情况下出现假阳性的可能性就非常高了。双蒸水经0.22微米滤器过滤后使用,另外所有其余试剂需要全新订购并且只能在PCR专用超净台中打开并混合。
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看看自己待扩增的片段的保守性特别注意引物结合区的保守性,如果保守性高的话那么空白对照在污染杂菌的情况下出现假阳性的可能性就非常高了。双蒸水经0.22微米滤器过滤后使用,另外所有其余试剂需要全新订购并且只能在PCR专用超净台中打开并混合。
相信我啦!!!!!!!!!!!!!!!...
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看看自己待扩增的片段的保守性特别注意引物结合区的保守性,如果保守性高的话那么空白对照在污染杂菌的情况下出现假阳性的可能性就非常高了。双蒸水经0.22微米滤器过滤后使用,另外所有其余试剂需要全新订购并且只能在PCR专用超净台中打开并混合。
相信我啦!!!!!!!!!!!!!!!
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1.之前做过吗,空白对照是不是没阳性,如果没阳性就是污染了
2.首先看下引物是不是用错了;所有东西都要用新的
只加上或下游引物去P,如果空白P出带就可以确定是哪个引物污染了
太不注意了吧,可怜孩,全换了吧,换个酶试试,然后换引物试试,总之一个个排除呗,