用琼脂糖凝胶电泳怎么检测DNA质量 什么是标准
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/09 02:03:14
用琼脂糖凝胶电泳怎么检测DNA质量 什么是标准
DNA如果降解或者混有其他杂质比如蛋白质、RNA的话,在电泳中可以检测的到.
线性的单一DNA样品一般是单条带,质粒的话可能会有2-3条带.
如果条带变宽、变暗、或者变成弥散的DNA条带,表示DNA非特异的降解.‘
如果条带变成多条,表示可能被酶切.如果质粒被单酶切,可能变成一条亮带.
如果有蛋白质污染,上样孔可能发亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分会有弥散.
等等.
标准是电泳条带亮度.通过亮度可以粗略计算DNA条带的含量.如果DNA有损失,对应的条带会变暗或者消失
1.电泳时选择在目标DNA分子量附近的有条带的DNA ladder一起电泳。
2.电泳结束后,Eb染色。用凝胶成像拍照。
3.然后用系统带的软件,根据ladder每一个条带的位置,直接分析目标条带DNA的碱基数量。因为通过凝胶电泳,ladder只给出了碱基数量的参考,例如DL2000,第一条带就是2000bp。
4.软件中如果有你用的ladder,直接选就好了,如果没有的话...
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1.电泳时选择在目标DNA分子量附近的有条带的DNA ladder一起电泳。
2.电泳结束后,Eb染色。用凝胶成像拍照。
3.然后用系统带的软件,根据ladder每一个条带的位置,直接分析目标条带DNA的碱基数量。因为通过凝胶电泳,ladder只给出了碱基数量的参考,例如DL2000,第一条带就是2000bp。
4.软件中如果有你用的ladder,直接选就好了,如果没有的话,就自己在软件里自定义设置一下。最后软件会根据ladder条带的位置计算出目标DNA的分子量的。
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