脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/07 03:25:24

细胞融合是一个随机的物理过程.在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬中,经融合后细胞将以多种形式出现.如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等.正常的脾细胞在培养基中存活仅5～7天,无需特别筛选,细胞的多聚体形式也容易死去.而未融合的瘤细胞则需进行特别的筛选去除.细胞DNA合成一般有两条途径.主途径是由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程.另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA.细胞融合的选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine,H）、氨甲蝶呤（aminopterin,A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine,T）,所以取三者的字头称为HAT培养基.氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂,可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA,而融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的HGPRT－细胞株,所以不能在该培养基中生长.只有融合细胞具有亲代双方的遗传性能,可在HAT培养基中长期存活与繁殖.有限稀释与抗原特异性选择：由于细胞融合是一个随机的过程,在已经融合的细胞中,有相当比例的无关细胞的融合体,需细筛选去除.筛选过程一般分为两步进行：一是融合细胞的抗体筛选,二是在此基础上进行的特异性抗体筛选.将融合的细胞进行充分稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在0至数个细胞之间（30％的孔为0才能保证每个孔中是单个细胞）,培养后取上清以ELISA法选出抗体高分泌性的细胞；这一过程常被习惯地称作克隆化.将这些阳性细胞再进行克隆化,应用特异性抗原包被的ELISA找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后进行冻存、体外培养或动物腹腔接种.

放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种脾细胞和脾细胞，脾细胞和瘤细胞，瘤细胞和瘤细胞。3种 ..放在选择性培养基上连续培养. 比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞没有相应的抗体所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生所以能够存活...

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脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么? 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?这是我们的一道考试题。能叙述原理吗？再谢！杂交瘤细胞是骨髓瘤细胞和B细胞,还是骨髓瘤细胞和效应B细胞融合?RT B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有什么样的特性? T淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后可制备杂交瘤细胞为什么不对关于小鼠骨髓瘤细胞用骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合后形成杂交瘤细胞,注射到小鼠体内,那么小鼠不会被骨髓瘤细胞毒害吗? 小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后形成杂交瘤细胞后有多少染色体已知小鼠体细胞中有40条染色体小鼠的骨髓瘤细胞可以和人的、小鼠的效应B细胞融合形成杂交瘤细胞吗? 制备单克隆抗体时为什么,第一次筛选时为什么会有多种杂交瘤细胞因为做完细胞融合后，存在5种细胞：未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B细胞、两两融合的骨髓瘤细胞，两两融合的B细胞，以哪—项属于克隆A.体外培养骨髓瘤细胞成为一个细胞系 B.．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细 B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞都能合成单克隆抗体吗制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞生物-细胞工程-杂交瘤细胞将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞不一定是杂交瘤细胞.为什么. 杂交瘤细胞筛选单克隆抗体制备筛选过程第一次选出骨髓瘤细胞和B细胞融合的细胞,第二次选出能产生需要的抗体的细胞,为什么之后还要进行多次筛选?在多次筛选后,为什么要植入小鼠体内培养和体外培养? 脾细胞和骨髓瘤细胞形成的杂交瘤细胞为什么不能无限增殖并产生单一抗体.RT. 体外培养杂交瘤细胞是什么技术就是筛选完杂交瘤细胞后的培养单克隆抗体中得到了杂交瘤细胞后为什么还要进行杂交瘤细胞的筛选?