如何提高半定量RT PCR结果的可靠性
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/13 14:10:02
如何提高半定量RT PCR结果的可靠性
总结我所做的RT-PCR的经验,提高半定量RT-PCR的可靠性或重复性需要注意的几点:
1.提取RNA前确保样品的正确保存,不能有降解.
2.提高RNA的过程中避免RNA酶的污染引起RNA部分降解.
3.提取的RNA需要保证无基因组DNA的污染,因此半定量PCR时需要设置对照组.
4.保证反转录的效率.
5.RT-PCR需要做几个重复孔,避免加样的误差.
6.所用的内参是否合适,因为管家基因的表达量只是相对保守,但视不同的处理方式会有变化.
有什么问题互相交流,
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